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固相萃取技术原理

固相萃取技术在样品处理中的应用

固相萃取(SPE)方法检测三聚氰胺

 

固相萃取柱的种类和应用范围

 

    固相萃取SPE(Solide Phase Extraction) 是利用吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基质和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱,达到分离或者富集目标化合物的目的。固相萃取实际上采用的是液相色谱的分离原理,分离模式主要包括反相、正相、离子交换和吸附。固相萃取所用的吸附剂与液相色谱常用的固定相相同,只是在填料的形状和粒径上有所区。一般来讲,固相萃取填料的粒径分布较液相色谱柱中的要宽,而且固相萃取小柱是一次性消耗品。固相萃取小柱的吸附剂通常装填于聚丙烯柱筒底部,并由上下两层聚丙烯或聚四氟乙烯筛板固定:也有96孔形式的固相萃取小柱。固相萃取小柱的大小规格、吸附剂的种类及装量都配有多种选择。固相萃取小柱使用的基本步骤包括以下五步(见图1):



图1 SPE 吸附模式的基本步骤


1.预洗

    预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。


2.活化

    首先用较强(洗脱能力的) 溶剂润湿吸附剂,而后再以较弱(洗脱能力的) 溶剂润湿小柱,从而保证样品在小柱上有足够的保留。


3.上样

     选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。液体样品被加到SPE 小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。


4.冲洗

    用不会把待测组份洗脱出来的溶剂(样品溶剂或稍强溶剂) 淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。


5.淋洗

    用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。对于收集到的淋洗液,可进一步吹干,用适当溶剂定溶,也可用于直接进样。

 

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